近年來，采用組培快繁技術(shù)對多肉植物進行繁殖的研究越來越多，并已在生產(chǎn)中獲得了廣泛的應用。隨著這一繁殖技術(shù)的推廣與使用，生產(chǎn)者發(fā)現(xiàn)，通過組織培養(yǎng)繁殖的商品苗在外觀形態(tài)上與分株或播種繁殖苗存在明顯的差異，其中，組培苗基部葉片較長，畸形，觀賞效果差，認為對這些葉片去除后會導致植株整體形態(tài)不完整，從而失去觀賞價值。其原因主要是由于移栽出的組培苗形態(tài)與自然繁殖苗不同，組培苗一般葉片細長，厚度不足，整體植株細弱，生長勢不強，因此導致組培苗需要較長時間的生長，新生葉才能恢復其正常的品種特征，不僅影響了這些多肉植物的商品價值，也增加了培養(yǎng)時間、提高了生產(chǎn)成本，從而影響了這一技術(shù)的應用前景。

  本研究以冰燈玉露再生苗為外植體，采用含有不同激素的培養(yǎng)基、不同的培養(yǎng)溫度及光照強度等方法，以找到適宜的促成其組培苗正常形態(tài)建成的培養(yǎng)條件，試驗結(jié)果可以減少組培快繁中冰燈玉露畸形苗的產(chǎn)生，縮短冰燈玉露組培苗移栽成苗的時間，可為研究其他多肉植物的組培快繁技術(shù)及其應用提供一定的參考。

  1 材料和方法

  1.1 植物材料

  供試冰燈玉露再生苗為天津農(nóng)學院園林植物實驗室提供。

  1.2 試驗方法

  1.2.1 不同激素對冰燈玉露形態(tài)建成的影響

  經(jīng)過增殖培養(yǎng)獲得的冰燈玉露組培苗在移栽前形態(tài)與自然生長苗存在較大差異。為了在移栽前對組培苗形態(tài)重建，將組培苗轉(zhuǎn)移到含有不同激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，以獲得生長外形與自然狀態(tài)下一致的幼苗。試驗采用100 mL三角瓶，每瓶加入40 mL培養(yǎng)基。每個處理做10瓶，每瓶接種5個再生苗。接種后將三角瓶放入組培室，培養(yǎng)條件為：25℃，24 h連續(xù)光照，光照強度2 000 lx。接種后每天觀察再生苗的生長情況，經(jīng)過約40 d培養(yǎng)，記錄再生苗在不同培養(yǎng)基上的形態(tài)變化情況。

  1.2.2 不同溫度對冰燈玉露形態(tài)建成的影響

  為了進一步研究冰燈玉露組培苗形態(tài)建成中溫度的影響，采用不同溫度(20，22，24，26，28℃)條件，對再生苗的生長變化進行試驗。采用1.2.1篩選出的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。試驗設(shè)計與1.2.1相同。接種后每天觀察再生苗的生長情況，經(jīng)過約30 d培養(yǎng)，記錄再生苗在不同溫度下的形態(tài)變化情況。

  1.2.3 不同光照強度對冰燈玉露形態(tài)建成的影響為了研究光照對冰燈玉露形態(tài)建成的影響，采用冰燈玉露組培苗，接種到1.2.2所用的培養(yǎng)基上。采用25℃，24 h連續(xù)光照，只是光照強度(1 500，2 000，2 500，3 000，4 000 lx)不同。接種后每天觀察再生苗的生長情況，經(jīng)過約40 d培養(yǎng)，記錄再生苗在不同光照強度下的形態(tài)變化情況。

  2 結(jié)果與分析

  2.1 不同激素對冰燈玉露形態(tài)建成的影響

  從表1可以看出，冰燈玉露組培苗在MS上生長基本都是形態(tài)不正常苗，這種苗葉片較自然條件下生長的要細，而且形狀與自然狀態(tài)下的苗不同，葉子分布不規(guī)則，葉子上端看不到“窗”的構(gòu)造。說明一般不經(jīng)過形態(tài)重建誘導，冰燈玉露組培苗移栽后很難在短時間內(nèi)長成自然狀態(tài)，使其具有一定的觀賞性。在培養(yǎng)基中附加一定量的IAA，情況并沒有好轉(zhuǎn)，而且組培苗出現(xiàn)了肉質(zhì)根，這類根形成后，植株生長緩慢，有的還出現(xiàn)褐變死亡現(xiàn)象。說明生長素不利于冰燈玉露組培苗的形態(tài)重建。當在培養(yǎng)基中添加BA后，情況有所改進，組培苗生長加快，同時葉片形態(tài)出現(xiàn)變化，葉片變厚，排列整齊，從外觀上基本與自然條件下相似;在不同BA濃度下，組培苗生長情況不同，效果好的是0.25 mg·L-1BA，當BA質(zhì)量濃度達到1.0 mg·L-1時，符合要求的組培苗數(shù)量減少，同時植株生長緩慢，植株變得矮小。因此，在適宜的BA濃度下，冰燈玉露的組培苗才能實現(xiàn)形態(tài)重建。本試驗還嘗試了同時加入BA與IAA，但效果與MS相同，沒有出現(xiàn)形態(tài)正常的組培苗。說明在MS培養(yǎng)基中添加0.25 mg·L-1的BA可以獲得部分植株形態(tài)與自然生長相似的組培苗。

  表1 不同激素對冰燈玉露形態(tài)建成的影響

  2.2 不同溫度對冰燈玉露形態(tài)建成的影響

  從表2可以看出，冰燈玉露形態(tài)正常率較高，原因主要是由于試驗采用的培養(yǎng)基為MS附加0.25 mg·L-1的BA，因此，組培苗形態(tài)普遍變得較為正常;但在不同溫度下，形態(tài)正常苗的比例有所不同，當溫度為20℃時，獲得的形態(tài)正常的組培苗數(shù)多，而隨著溫度的增加，組培苗恢復率也逐漸下降，到28℃時，僅有38%。說明冰燈玉露形態(tài)建成培養(yǎng)的溫度應采用較低的溫度。在試驗中，也曾采用18℃進行培養(yǎng)，但結(jié)果顯示，幾乎所有組培苗都停止生長，只有個別生長正常，說明過低溫度也不利于冰燈玉露組培苗的形態(tài)建成。雖然在20℃時可以獲得較高的冰燈玉露組培苗的恢復率，但也因溫度較低，組培苗生長速度較慢，也不是理想的培養(yǎng)條件。為此，試驗又采用不同光照強度來提高形態(tài)重建率，希望獲得較高、較快的冰燈玉露形態(tài)重建培養(yǎng)。

  表2 不同溫度對冰燈玉露形態(tài)建成的影響

  2.3 不同光照強度對冰燈玉露形態(tài)建成的影響

  試驗采用 1 500，2 000，2 500，3 000，4 000 lx的光照強度，對冰燈玉露新增殖的小苗進行24 h連續(xù)光照培養(yǎng)，同時采用附加0.25 mg·L-1BA的培養(yǎng)基和20℃的培養(yǎng)溫度。

  從表3可以看出，在不同光照強度條件下，冰燈玉露組培苗在生長速度與形態(tài)上出現(xiàn)較大變化，畸形苗恢復率明顯提高，生長速度也有所加快，說明光照強度對于組培苗生長速度與形態(tài)建成有較大影響。從形態(tài)恢復率來看，在光照強度為3 000 lx時效果好，同時組培苗的生長速度也較快。因此，選擇光照強度為3 000 lx，溫度為20℃，在含有0.25 mg·L-1BA的培養(yǎng)基上，冰燈玉露組培苗可以正常生長，獲得的組培苗在移栽前就能達到自然狀態(tài)下的正常形態(tài)。

  表3 不同光照強度對冰燈玉露形態(tài)建成的影響

  3 結(jié)論與討論

  在本試驗中，冰燈玉露組培苗在移栽前的形態(tài)與自然條件下的形態(tài)不一致的情況，在許多植物培養(yǎng)中普遍存在，其中原因很多，大致可以概括為幾個方面。第一，組培條件下生長環(huán)境與自然環(huán)境之間的差異，導致一些性狀不能很好地表達。如在強光照下，才能出現(xiàn)的一些性狀，在組培條件下很難達到，因為組培苗在一個密閉的空間內(nèi)，過強的光照會導致其生存空間內(nèi)的溫度過高，從而影響組培苗的生長。本試驗中僅采用光照3 000 lx的強度，其是自然光照下強度的1/11，因此，環(huán)境是造成組培苗畸形的主要因素。當組培苗移栽到自然環(huán)境下時，很快又能恢復其自然生長的特性。第二，組培苗處于人為干擾下的生存方式，如光合作用不能夠很好建立，因為在培養(yǎng)基中添加了蔗糖作為能源物質(zhì)。在培養(yǎng)基中附加激素來引導其生長分化，與自然條件下其自身自我調(diào)節(jié)的結(jié)果不同，被動地生長必將改變其特有的表現(xiàn)型。本試驗也是通過改變培養(yǎng)基中的激素，從而達到冰燈玉露的形態(tài)重建。第三，組培生長是一種與正常生長不同的過程，正常生長植物從種子到發(fā)芽，再到開花、結(jié)果，是按照自然規(guī)律進行的，而組培生長一般是從某個階段直接進行或者是從后向前進行。如從某種成熟組織誘導再生，就是一種逆向生長，形態(tài)出現(xiàn)畸形是很正常的。因此，要想在組培階段獲得形態(tài)與自然條件下的一致就要有一個形態(tài)重建的過程，再次通過人為干預達到與自然相近的生長形態(tài)。

  本試驗研究了激素、光照和溫度對冰燈玉露組培苗生長形態(tài)的影響，獲得生長正常、與自然條件下形態(tài)相似的組培苗培養(yǎng)體系，結(jié)果表明，將新增殖的冰燈玉露較小的組培苗選擇光照強度為3 000 lx，連續(xù)光照24 h，并在溫度為20℃以及在含有0.25 mg·L-1BA的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，可以獲得正常生長的冰燈玉露組培苗，且獲得的組培苗在移栽前就能達到自然狀態(tài)下的正常形態(tài)。